寵物消毒液犬小孢子菌殺滅試驗(yàn)：菌懸液制備與濃度控制關(guān)鍵步驟

76次 2025.10.29

　　寵物消毒液犬小孢子菌殺滅試驗(yàn)主要用于評估消毒液對犬小孢子菌的滅活效果，屬于實(shí)驗(yàn)室檢測手段。該試驗(yàn)通過模擬實(shí)際消毒場景，檢測消毒液在規(guī)定條件下（如濃度、作用時(shí)間等）對犬小孢子菌的殺滅能力，以確定其消毒效果及安全性。?


寵物消毒液犬小孢子菌殺滅試驗(yàn)


　　寵物消毒液犬小孢子菌殺滅試驗(yàn)關(guān)鍵步驟


　　（1）菌懸液制備


　　1.菌種活化：確保菌株活性


　　從菌種保藏管中取少量犬小孢子菌，劃線接種到沙堡弱葡萄糖瓊脂（SDA）斜面，25-28℃恒溫培養(yǎng)7-10天。


　　目的：讓休眠的菌株恢復(fù)活性，形成形態(tài)飽滿、純度高的單菌落，避免因菌株活力不足導(dǎo)致試驗(yàn)偏差。


　　2.菌苔洗脫：獲取初始菌液


　　在生物安全柜內(nèi)，用無菌生理鹽水（提前滅菌并冷卻至室溫）沖洗SDA斜面的菌苔，沖洗時(shí)用無菌棉簽輕輕刮擦菌落（避免刮下培養(yǎng)基），收集洗脫液于無菌離心管中。


　　用量控制：每支斜面加入5-10mL無菌生理鹽水，確保菌苔充分洗脫，減少菌量損失。


　　3.離心純化：去除雜質(zhì)干擾


　　將收集的洗脫液放入離心機(jī)，1000-1500rpm離心5分鐘（轉(zhuǎn)速過低無法沉淀菌體，過高易破壞菌體結(jié)構(gòu)）。


　　棄去上清液（含培養(yǎng)基殘?jiān)⒋x廢物），加入等量無菌生理鹽水重懸沉淀，重復(fù)離心1-2次，最終得到純化的菌體沉淀。


　　4.初步混懸：形成待調(diào)菌液


　　向純化后的菌體沉淀中加入10-20mL無菌生理鹽水，用無菌移液管輕輕吹打3-5次，使菌體均勻分散，避免形成菌團(tuán)（菌團(tuán)會導(dǎo)致后續(xù)濃度計(jì)數(shù)不準(zhǔn)）。


　　（2）菌懸液濃度控制


　　1.濃度校準(zhǔn)：用“平板計(jì)數(shù)法”精準(zhǔn)定標(biāo)


　　這是最權(quán)威的濃度控制方法，需同步進(jìn)行，確保濃度符合10?-10?CFU/mL要求。


　　步驟1：梯度稀釋。取初步混懸的菌液1mL，加入9mL無菌生理鹽水，制成10?1稀釋液；再取10?1稀釋液1mL，加入9mL無菌生理鹽水，制成10?2稀釋液，依此類推，制備10??、10??、10??三個(gè)梯度的稀釋液（根據(jù)初步菌液密度調(diào)整，優(yōu)先選菌落數(shù)能落在30-300CFU的梯度）。


　　步驟2：涂布計(jì)數(shù)。取每個(gè)梯度的稀釋液0.1mL，均勻涂布在SDA平板上，每個(gè)梯度做3個(gè)平行平板，25-28℃培養(yǎng)7-10天。


　　步驟3：濃度計(jì)算。培養(yǎng)結(jié)束后，計(jì)數(shù)每個(gè)平板的菌落數(shù)，取3個(gè)平行平板的平均值，按公式計(jì)算：


　　菌懸液濃度（CFU/mL）=平板平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×10（因涂布量為0.1mL，需×10換算成1mL濃度）。


　　2.濃度調(diào)整：確保符合試驗(yàn)要求


　　若濃度過高（＞10?CFU/mL）：用無菌生理鹽水逐步稀釋，每稀釋一次后，取少量按上述平板計(jì)數(shù)法復(fù)核，直至濃度降至10?-10?CFU/mL。


　　若濃度過低（＜10?CFU/mL）：將初步混懸的菌液離心（1000rpm，5分鐘），棄部分上清液，減少稀釋體積，再用平板計(jì)數(shù)法復(fù)核，直至濃度達(dá)標(biāo)。


　　寵物消毒液犬小孢子菌殺滅試驗(yàn)主要用于驗(yàn)證寵物消毒液對犬小孢子菌的殺滅效果，確保其在實(shí)際應(yīng)用中能有效降低寵物環(huán)境中的真菌污染風(fēng)險(xiǎn)。中科檢測是專業(yè)的消毒產(chǎn)品檢測機(jī)構(gòu)，具體檢測費(fèi)用可以咨詢中科檢測工程師了解。?


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